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Les outils de génétique moléculaire

Les techniques liées aux acides nucléiques
Amplification et sélection d'acides nucléiques particuliers

 
 
  Utilisation des vecteurs recombinés

Technique des hybrides somatiques monochromosomiques

Collection de lignées cellulaires contenant chacune un unique chromosome humain. Ce sont des hybrides somatiques obtenus par fusion de cellules humaines avec des cellules de rongeur (hamster ou souris), qui après fusion, éliminent la plupart des chromosomes humains (sauf un).
Cette technique permet de déterminer de quel chromosome humain provient une séquence d'ADN ou un clone donné (par hybridation ou par PCR avec ces hybrides). Voir FISH.

Techniques des double et triple hybrides

Le système double-hybride a été développé en 1989. Il consiste à introduire dans une cellule les gènes codant les deux protéines étudiées. Si ces protéines interagissent, la cellule adoptera un phénotype aisément repérable, par exemple le produit d'un gène rapporteur.
  • La variante simple hybride permet de tester l'interaction entre un fragment d'ADN et une protéine.
  • La variante triple hybride permet de détecter les interactions trimériques (tester la modulation d'une interaction protéique connue par une 3ème protéine ...).
   

© Université de Tours - 7 janvier, 2008