Spectrophotométrie

Cette méthode est moins employée pour le dosage des produits de PCR que l’électrophorèse présentée précédemment. Ceci étant, nous avons trouvé intéressant de vous montrer qu’il existe souvent plusieurs méthodes à votre disposition pour réaliser certaines analyses et que bien sur les résultats doivent être cohérents d’une technique à l’autre.

Conditions expérimentales
On prélève un échantillon de 5µl de la solution de départ d’ADN amplifié (rappel volume total: 50 µl). On dépose cet échantillon dans 1 ml d'eau. La densité optique est lue à 260 nm sur cet échantillon.
NB:
ADN double brin à 260nm 1U.D.O.=50 µg/ml
ADN simple brin à 260nm 1U.D.O.= 33 µg/ml
ARN à 260nm 1U.D.O.= 40 µg/ml

Résultats
La lecture du spectrophotomètre indique une DO à 260nm de 0.004. Calculez la concentration de l’échantillon d’ADN soumis au spectrophotomètre. N’oubliez pas de noter soigneusement toutes vos réponses sur votre cahier d’expérience.

Pour vous aidez, vous pouvez consulter : point4

revenir à la page précédente	retour à la première page	aller à la page suivante de l'exercice

© Université de TOURS - GÉNET
Document modifié le 17 juillet, 2017