On ajoute aux bactéries compétentes les éléments suivants :
Numéro du tube | Contenu | rôle |
1 | E.coli | Contrôle de non contamination |
2 | E.coli + PGEM-T | Contrôle du vecteur |
3 | E.coli+ mélange de ligation | Transformation |
NB: Si on souhaite tester le niveau de compétence des bactéries utilisées, on peut faire un tube supplémentaire (4) contenant un autre vecteur tel que Pbr322 (0.05 µg)+ E.coli.
Le contenu des ces différents tubes vont être étalés sur des boites de pétri
dont les milieux de cultures sont différents :
Notation des milieux contenus dans les boites de pétri
LB : milieu de luria burani
LB+Amp : Milieu Luria Burani + ampiciline
LB+Amp+Xgal : milieu Luria Burani + Ampicilline + 5-bromo-4-chloro-3-indoyl-ß-D-galactopyranoside
(substrat de la B_galactosidase).
+ IPTG (inducteur indispensable)
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Document modifié le
17 juillet, 2017